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患有短期健忘症的多莉（艾伦·德杰尼勒斯ElleDeGeeres配音）曾经也拥有美好的家庭，然而一连串的意外让她与和蔼可亲的父母失散。此去经年，多莉邂逅了小丑鱼父子马林（艾伯特·布鲁克斯AlbertBrooks配音）和尼莫（海登·罗兰斯HaydeRolece配音），与他们经历了前所未有的大冒险。平静的日子里，童年时期的片段记忆突然闯入多莉的脑海，于是她再度踏上寻找父母的旅程。这一次，她来到了海洋生物博物馆，遇到了不打算回到大海的章鱼汉克（艾德·奥尼尔EdO'Neill配音）以及童年时的朋友
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波斯顿最高海军“Ivy League”出身的旗鱼“派”并没有其他鱼儿相象中的威猛，反而只是一条外表平庸的小鱼，因为在一次不幸的意外事故中失去了双亲，伤心的他决定离开故地，只身前往加勒比海岸，然而他却不知道，危险就在那边等着他…… 派与其他的鱼不同，他有着极为敏感的内心世界，不过却十分单纯，不懂海洋里的人情世故，未知的加勒比显得那样的陌生。不过初来咋到的他却认识了超级模特“Cordelia”，两鱼一见钟情，不过问题来了，一直对Cordelia虎视耽耽的shark是加勒比一带有名的混混，霸道异常，他怎么能放
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水族箱里诞生了4条小鱼，其中包括哈罗德的女儿伊莎贝尔。伊莎贝尔的身上长着不好看的斑点还缺失了一些鳞片，她的长相遭到鱼群的其他成员嘲笑。鱼群首领瑟斯顿要求哈罗德必须把伊莎贝尔藏起来否则被人来发现将会把他们丢进大海里。贪玩的伊莎贝尔还是被人类发现了，她和哈罗德一起被丢进浩瀚无边的大海里。海上突如其来的巨大风浪使得水族箱里的鱼都掉进大海,一时之间，伊莎贝尔和哈罗德失散了。伊莎贝尔偶遇了艾普尔并结识了一群长相奇特的鱼，它们皆因外在缺陷被同族排挤。在艾普尔的带领下，伊莎贝尔和其它鱼准备穿越火山抵达珊瑚礁寻找哈罗德。
